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人类及动物卵子和胚胎玻璃化冷冻 – 更好的冷冻载体及技术

 

人类及动物卵子和胚胎玻璃化冷冻 – 更好的冷冻载体及技术

       韦拓生物的玻璃化冷冻液和解冻液在胚胎实验室中越来越受欢迎。然而,传统的玻璃化冷冻载体 – 玻化冻存管(敞开式拉管,以下简称OPS)却不是胚胎实验室中更常见的冷冻载体。原因很简单:虽然OPS是首先发明的,但其它冷冻载体可能有着更好的工业背景或更多的宣传。多数人类胚胎实验室只听说过薄片式的高速玻璃化冷冻法,几乎很少考虑这种方法是否还存在替代方案。在有着可靠的理证据支撑前,人们不会冒险用一个新的方法来取代现有的方法。

       现在有很好的理由考虑改变。

韦拓生物的OPS有着高标准的生产体系,在全球范围内销售。OPS有着多种多样的学习和使用方式,包括手册、视频、现场研讨会、在线咨询以及独具创意的教学APP,该APP详细介绍了冷冻、储存和解冻的全过程。

      与其他冷冻载体相比, OPS在装载和排出样品的操作上更加容易,不少玻璃化冷冻领域专家也对这点表示惊叹。并且对于年轻的胚胎学家来说,成功并持续地使用OPS也更容易,学习和练习的时间也更短。

      请相信这些观点。此外,尽量去避免可能存在的误解:

       1. 不要认为OPS是 “对传统技术的修改” 。事实恰恰相反,OPS是第一个专门用于高速玻璃化冷冻的工具和方法。其他工具只是对其结构和技术进行了调整。至少可以说,这些调整并不总像想象中成功。

       2. 就样本的装载、冷冻、解冻和排出而言,OPS方法与其他工具不同,但却更容易,甚至在这些步骤的时间选择上都是独一无二的。详细的操作方法可以再我们的辅助材料中相关描述。请花几分钟去理解它们,再花几个小时去学习它们。

       结果会证明你的选择是正确的。第一例经玻璃化冷冻人类卵子、原核期及2-细胞期胚胎诞生的婴儿均使用了OPS方法。OPS也成功应用于动物物种的卵母细胞和胚胎的首次玻璃化冷冻,包括那些没有透明带或经过各种操作的胚胎。

     此外,与其他玻璃化冷冻方法相比,OPS方法具有一些独特的优点:

      1. 卵母细胞和胚胎在OPS管内比在薄片上更能避免机械损伤;

      2. 样品不会附着在薄片上,而是被冷冻液包裹,在解冻后可轻易排出;

      3. 尽管装载的过程迅速,但液体的体积是恒定的:在确保所需的冷冻和升温速率的同时,保护样品免受蒸发和渗透性损伤。

       一个意想不到的信息是,有观点认为在装载卵母细胞/胚胎时,不应该尽量减小液滴量,并且在社交平台上进行了推广。而到目前为止,薄片式载体的推荐操作方式仍是建议去除大部分液体,该方式被广泛推广,并在全球范围内得到了一定认可。

       事实上,并不是所有人都认可去除大部分液体这种方式。一个纯粹但确有效的经验:缺少溶液或扁平的液滴可能导致一个不太理想的结果,这可能来自渗透性损伤。蒸发可诱导液体浓度的升高,特别是在层流环境下。

       我们不得不注意到,这些新的推荐方式,将液滴保持在薄片上的高处,似乎是在重复发明,因为OPS总是使用更大的液滴和液柱,以完全消除平坦的液滴可能对卵母细胞/胚胎的伤害。

       这是一个历经24年的建议,因为OPS最初发表于1998年。